蝉贝口服液的澄清工艺研究

发布于:2021-11-27 23:06:18

第 27 卷   2 期 第
2 0 0 9年 2月

中            华 中 医 药 学 刊
CH IN ES E  ARCH IVES  O F  TRAD IT IONAL  CH IN ES E  M ED IC IN E

Vol 27 No. 2 . Feb. 2 0 0 9

中 药 研 究 扫 描

蝉贝口服液的澄清工艺研究
王   ,刘晓昱 ,吴锡铭 佩
1 1 2

     : 目的 : 优选蝉贝口服液的澄清工艺 。方法 : 通过观察澄清度 、 摘 要 测定总生物碱含量 ,比较了硅藻土吸附 法、 乙醇沉淀法 、 壳聚糖澄清法 、 离心法 、 大孔树脂吸附技术 5 种澄清工艺的差异 。结果 : 5 种澄清工艺对 2 个指 标均有不同程度的影响 ,其中大孔树脂吸附技术既能保留有效成分 ,且溶液澄清 。结论 : 大孔树脂吸附技术可作 为蝉贝口服液的澄清工艺 。 关键词 : 蝉贝口服液 ; 澄清工艺 ; 大孔树脂吸附 中图分类号 : R284      文献标识码 : A    文章编号 : 1673 - 7717 ( 2009 ) 02 - 0428 - 03

( 1. Laboratory of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou Traditional Chinese Medical Hosp tital, Hangzhou 310007, Zhejiang, China; 2. Hangzhou Sixth Peop le’s Hosp ital, Hangzhou 310014, Zhejiang, China)

Abstract: O bjective: To choose the best clarification p rocess of Chanbei oral solution. M ethods: By deter ining total m alkaloidal content and clarity, five clarifying p rocess including diatomaceous earth adsorp tion, ethanol p recip itation, chi2 tosan clarification, centrifugation and macroporous resin adsorp tion were compared. R esu lts: Five clarification p rocess had tion clarifying Conclusion: M acroporous resin adsorp tion can be used as clarification p rocess of Chanbei oral solution. . Key words: Chanbei oral solution; clarification technique; macroporous resin adsorp tion different level effect on the two index M acroporous resin adsorp tion could reserve more active components and make solu2 .

中 华 中 医 药

   蝉贝合剂是本院国家级名老中医的临床验方 ,由蝉蜕 、 浙贝母 、 桔梗 、 黛蛤散 、 前胡等 11 味中药材提取纯化而成 , 具有清热宣肺 ,化痰利咽的功效 ,用于咳嗽咽痒 。经临床长 期使用表明 ,本品对干咳无痰 ,咽痒有确切疗效 。为服用方 便 ,提高制剂疗效 , 笔者欲将其制成蝉贝口服液 。水煎煮 时 ,提取出了方中的有效成分 ,同时也溶出了不少淀粉 、 黏 液质 、 蛋白质 、 树脂 、 鞣质等无效成分 ,这些成分若不除去 , 会影响制剂的质量 。为了提高制剂质量 ,本实验以澄明度 、 总生物碱含量作为质量考察的标准 ,对硅藻土吸附法 、 乙醇 沉淀法 、 壳聚糖澄清法 、 离心法及大孔树脂吸附技术进行了 比较 ,以优选最佳澄清工艺 。 1  仪器和试药 岛津 UV2550 紫外分光光度仪 、 104 - N 电子天* AB (M ETTLER TOLEDO ) 、 - 8 离心机 。药材购于浙江中医 AB 药大学中药饮片厂 ,经鉴定符合 2000 年版药典标准 ) ; 贝母 素甲 (中国药品生物品检定所 , 110750 - 200506 ) ; 药材 (浙 江中医药大学中药饮片厂 , 经鉴定符合《中华人民共和国 药典 》 2005 版一部有关标准 ) ; 硅藻土 (上海奉贤奉城试剂 厂 ) ; 壳聚糖 (华东理工大学理学院华凯科技贸易公司 ) ; AB
收稿日期 : 2008 - 09 - 12

学 刊

作者简介 : 王佩 ( 1973 - ) , 女 , 副主任药师 , 硕士 , 主要从事医院制 剂的研发工作 。

( 11杭州市中医院中药实验室 ,浙江 杭州 310007; 21杭州市第六人民医院 ,淅江 杭州 310014 )

Stud ies on the C lar if ica tion Fechn iques of Chanbe i O ra l Solution
WANG Pei , L IU Xiao 2yu ,WU Xi2 ing m
1 1 2

- 8 大孔树脂 (天津南开大学化工厂 ) ,其余试剂均为分析

纯。

2  方法与结果 211   澄清工艺

按处方量照最佳工艺制备至浓缩液 , 分装 5 份 , 每份

20mL ,并分别用不同澄清方法处理 。

取上清 ,用滤纸反复过滤 3 次 , 滤液定容至 20mL , 灌封 , 灭 菌 ,得成品 。

以上 ,离心 ,上清液回收乙醇后定容至 20mL ,灌封 ,灭菌 ,得 成品 。
21113   壳聚糖澄清法   取药液在 60 ~70 ℃ 条件下缓慢加 21114   离心法   取药液离心 2500 r/m in, 15m in, 取上清冷

入 1%壳聚糖醋酸溶液 5mL ,边加边搅拌 ,加完后继续保温 搅拌 20m in,室温放置过夜后 , 离心取上清定容至 20mL , 灌 封 ,灭菌 ,得成品 。

藏过夜 ,再次离心 2500 r/m in, 15m in, 上清定容至 20mL , 灌 封 ,灭菌 ,得成品 。

大孔树脂 ,径高比约 1: 10,先用水洗至基本无色后 ,用 70% 乙醇进行洗脱至基本无色 ,洗脱液回收乙醇后冷藏放置过

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21111   硅藻土吸附法  取口服液 20mL , 加硅藻土 014g (2% )处理 ,放置 1h左右用纱布过滤 ,滤液冷藏过夜 , 离心 21112   醇沉法   取药液加乙醇使含醇量为 75% ,静置 24h 21115   大孔树脂法   取药液稀释至 80mL 左右 ,过 AB - 8

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夜 ,离 心 ( 2500 r/m in, 15m in ) 取 上 清 液 , 上 清 液 定 容 至 20mL ,灌封 ,灭菌 ,得成品 。
21211   标准曲线的制备   精密称取贝母甲素标准品适量 , 用 012mol/L 邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液 ( pH510 ) 溶解配制 212   总生物碱含量测定
澄清方法 硅藻土吸附法 醇沉法 壳聚糖澄清 离心法 大孔树脂吸附 因素 水*
1 2 3 A
〔〕 1

 

μ 成 56116 g/mL 的对照品贮备液 。精密量取对照品贮备液 0、 10、 10、 10、 10、 10mL 置于分液漏斗中 , 分别精密量 1 2 3 4 5 取 012mol/L 邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液补足至 5mL ,精密加 入 01001mol/L 的溴麝香草酚蓝溶液 2mL ,摇匀 。精密加入 氯仿 15mL , 强力振摇提取约 5m in, 静置使分层 。取氯仿 释至 10mL 左右 , 加氨水 1 ~ 2 滴 , 用氯仿萃取 3 次 , 每次 15mL ,合并氯仿液 ,氯仿液蒸干后用 012mol/L 邻苯二甲酸 氢钾缓冲溶液溶解并定容至 25mL , 取 5mL , 照标准品方法 测定吸光度 。 213  澄清结果 将上述样品室温放置 3 天 ,观察澄清度 ,并测定总生物 碱含量 ,结果见表 1。 表 1  不同澄清工艺的比较
澄清度 生物碱含量 (mg /mL)
0. 863 0. 031 0. 482 0. 841 0. 659 + + +

层 ,用干燥滤纸滤过 , 取滤液于 412nm 处测定吸光度 。得 标 准 曲 线 C = 741872A + 115907, 线 性 范 围 111232 ~ μ 56116 g /mL。
淀 ; + : 溶液微混 ,少量沉淀 ; ±溶液澄清 ,微量沉淀 。 :

物碱含量较高 ,且外观澄明度较好 ,故为一种较好的澄清工 艺 。为了得到更理想的澄清效果 ,采用正交设计法确定大 孔树脂吸附的最佳方案 。 21411   正交表的设计   选用 L9 ( 34 ) 正交试验表 , 以总生 物碱 、 总固体量为指标 ,根据影响大孔树脂吸附过程中存在 的诸多因素 ,考虑径高比 、 药液浓度和流速等设计了因素水 *见表 2。 表 2  因素水*
B C

浸泡后煎煮 、 过滤 、 浓缩 、 离心 ,上清液按正交表药液浓度调 整 ,制得 9 个样品 。

21212   供试品溶液的测定   精密量取供试液 1mL ,加水稀
±
+ + + + + +

总生物碱
K1 K2 K3 R

   : + + + : 溶液混浊 , 沉淀明确 ; + + : 溶液混浊 , 并出现沉 注

214   正交设计优选大孔树脂最佳吸附工艺
径高比
1∶ 15 1∶ 10 1∶ 5

由上述实验结果可以看出 ,大孔树脂处理的样品总生

药液浓度 ( g /mL)
0. 6 0. 4 0. 2

流速 (mL /m in)
1 2 3

干燥至恒重的蒸发皿中 , 水浴蒸干 , 残渣于 105 ℃ 干燥 3h 至恒重 ,取出 ,置于干燥器中放置 015h, 冷却至室温 , 迅速 精密称重 。 21414   总生物碱含量测定   按照前述 212 方法 。 21415   结果分析  按正交表 L9 ( 34 ) 安排试验后 , 结果见 表 3 ~4。 表 3  L9 (34 )正交试验表
C 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 D 4 1 2 3 2 3 1 3 1 2

由直观分析可知 , 影响总固体的因素顺序为径高比 (A ) >药液浓度 (B ) >流速 ( C ) ; 影响总生物碱含量的因素 顺序为径高比 ( A ) >药液浓度 ( B ) >流速 ( C ) 。生物碱含 量的极差的大小顺序分析结果 ,认定各因素的主次顺序的 最佳工艺为 A2 B2 C1 。但经方差分析 C 因素对实验结果无 影响 ,从实际操作考虑 ,确定最佳工艺为 A2 B2 C2 。 215   验证试验

21413   总固体量   精密量取 10mL 样品溶液 ,分别置于已
试验号
1 A 1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 B 2 1 1 1 2 2 2 3 3 3

试验结果

总固体 ( g)
0. 8858 2 3 3 1 2 2 3 1

总生物碱 (mg/mL)
0. 534 1. 2228 1. 0745 1. 3681 1. 5207 1. 6899 0. 8684 0. 8963 0. 9043

0. 644 0. 459 0. 781 0. 837 0. 811 0. 444 0. 629 0. 438 K1 K2 K3 R

总固体

1. 061 1. 526 0. 890 0. 636

1. 041 1. 213 1. 223 0. 182

1. 157 1. 165 1. 155

1. 104 1. 260 1. 113

0. 0100 0. 6580 0. 6213 0. 5800 0. 078

0. 1560 0. 6030 0. 6330 0. 6230 0. 0300

0. 5457 0. 8097 0. 5040 0. 3057

0. 5863 0. 7037 0. 5693 0. 1344

表 4  总生物碱含量的方差分析结果
方差
F

方差来源 离均差*方和 自由度
A 因素 B 因素 C 因素 0. 1649 0. 0320 0. 0091 0. 0014 0. 2074 2 2 2 2 8

P

0. 0825 0. 0160 0. 0046 0. 0007

117. 8 22. 86 6. 500

< 0. 05 < 0. 05 > 0. 05

误差 总和

   : F0. 05 ( 2, 2) = 19. 00。 注

21412   样品制备   按处方分别称取干燥药材各 9 份 ,加水

为了验证上述结果的准确性 , 以保证提取工艺的合理 可行 ,按上述确定的工艺条件 ,安排重复试验 ,试验结果见 表 5。 经重复最佳条件 A2 B2 C1 实验 ,得到总固体和总生物碱的 量与正交表中 9个实验结果基本一致。故确定大孔树脂澄清 工艺为径高比 1∶ 药液浓度 014g/mL,流速 2mL /m in。 10,
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学 刊

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增生颗粒正交试验优选最佳提取工艺
廉   ,张   ,马丽颖 丽 铭
1 2 2

   中药制剂工艺的现代化 ,除了按照中医药理论组方外 , 十分重要的一环是提取稳定的有效成分 ,尽量减少有效成 分的损失 。本处方为本院制剂品种 , 由黄芩 、 丹参等 22 味 中药组成 ,为了确保疗效 ,本方提取工艺的确定是以方中主 药有效成分黄芩苷的的提取程度为依据 ,对本制剂的提取 工艺进行了优化探讨 。 1  实验仪器 CQ - 250 型超声清洗器 , 超临界 CO2 提取罐 , 旋转蒸 发仪 ,恒温水浴锅 ,煎煮罐 ,喷雾干燥机 , LC - 6A 高效液相 仪 (日本岛津 ) , C - R3A 色谱数据处理机等 。实验试剂 : 蒸 馏水 ,甲醇 、 乙醇 、 氯仿 、 甲酸 、 冰醋酸 、 硫酸等 。 2  乙醇浓度的筛选 根据影响提取的因素 ,首先固定加醇量 、 回流提取时间 、 表 5  最佳工艺重复试验结果 ( n = 3 )
总固体量 ( g)
1. 5380 1. 5764 1. 4861 1. 534 ± 045 0.

重复试验样品

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3    讨 论

实验结果表明 ,醇沉法澄清度最佳 ,但主成分生物碱含 量极低或几乎全部被除尽 ; 硅藻土吸附 、 离心法总生物碱虽
收稿日期 : 2008 - 09 - 14

学 刊

作者简介 : 廉丽 ( 1970 - ) ,女 ,辽宁沈阳人 , 副主任药师 , 学士 , 主要 从事医院制剂质量研究 。

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     : 目的 : 优选增生颗粒提取工艺 。方法 : 以黄芩苷的含量作为考察指标 ,确定生产中乙醇浓度 ; 以干膏 摘 要 收率和黄芩苷的含量为评价指标 ,确定最佳醇提工艺 。结论 : 增生颗粒的最佳提取工艺为采用 70%乙醇 , 8 倍量 回流提取 2 次 ,每次 115h。 关键词 : 增生颗粒 ; 提取工艺 ; 高效液相 ; 黄芩苷 ; 正交设计 中图分类号 : R28412      文献标识码 : A    文章编号 : 1673 - 7717 (2009) 02 - 0430 - 02

Abstract: O bjective: To op tim ize the extraction p rocess of Zeng2sheng granuls M ethods: A lcohol concentration was de2 . term ined by the index baiealin; The op tim al alcohol extraction technology were investigated w ith the content of baicalin and dry extractive material taken as indexes, meanwhile. Conclusion: The op tim ized extraction p rocess p reparing of Zeng2sheng granuls is extracting circumfluencely w ith 8 tim es volume of 70% alcohol in 2 tim es and 115 hours every tim e. Key words: Zeng2sheng granuls; extraction p rocess; HPLC; baiealin; orthogonal design
总生物碱量 (mg /mL)
0. 8465 0. 7867 0. 7829 0. 8053 ± 036 0.

1 2 3
x

( 11沈阳市沈河区中医院 ,辽宁 沈阳 110013; 21辽宁中医药大学附属医院 ,辽宁 沈阳 110032 )

Study on Process Technology of Zengsheng Granuls
L I N L i , ZHANG M ing ,MA L i2ying A
1 2 2

21 The Affiliated Hosp ital of L iaoning University of TCM , Shenyang 110032, L iaoning, China)

( 11 Shenyang Shenhe D istrict Hosp ital of TCM , Shenyang110013, L iaoning, China;

回流提取次数 ,对乙醇浓度进行考察 。样品的制备 : 取黄芩 1615g,加入 90%乙醇 、 乙醇 、 乙醇 、 乙醇 、 乙 70% 50% 30% 0% 醇 (水 ) 6 倍量 , 回流提取 2h, 趁热滤过 , 滤液浓缩 , 转移至 100mL 量瓶中 ,加 70%乙醇至刻度 ,摇匀 ,备用 。考察指标 : 以黄芩苷的含量作为考察指标 。黄芩苷的测定 : 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 , 柱温 40 ℃, 以甲醇 01025mol/L 磷酸水 ( 45 ∶ )为流动相 ,检测波长 278nm,流速 55 1mL /m in。对照品的制备 :精密称取在五氧化二磷减压干燥 器中干燥 36h 的黄芩苷对照品 ,配成含黄芩苷 01039mg/mL 的甲醇溶液 。供试品的制备 : 精密吸取上述样品液各 1mL, 转至 25mL 量瓶中 , 加甲醇至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶液 。 μ 对照品液 20 L, 按上 μ 测定法 :分别精密吸取供试品液 5 L、 述色谱条件测定 ,计算含量 。结果见表 1。 高 ,而澄清度较差 ,沉淀也多 。大孔树脂处理的样品总生物 碱、 澄清度均达到较理想的效果 。 经正交设计法优选大孔树脂的最佳吸附工艺时发现 , 径高比和药液浓度对产品的有效成分含量有显著影响 。在 本次试验选定的条件中 , 最适宜的工艺为径高比 1 ∶ 、 10 药 液浓度为 014g/mL、 流速 2mL /m in。 参考文献 由于中药成分非常复杂 ,以总生物碱为指标不能代表 整个处方的疗效 ,选用大孔树脂作为澄清工艺 ,还有待结合 药效学 、 毒理学和临床疗效等深入研究 。
[1 ]  李娟 ,张鹏 ,张国欣 , 等 . 息咳胶囊中湖北贝母总生物碱含量

测定万法的研究 [ J ]. 中国中药杂志 , 2005, 30 ( 12) : 947 2 948.


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